Wie wird reines Meerwasser hergestellt?

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Kategorie: Kultivierung

Wie wird reines Meerwasser hergestellt ?

Für eine reine Phytoplankton-Kultur benötigt man filtriertes Meerwasser, da keine anderen Kleinstlebewesen das Plankton beim Heranwachsen stören sollen. Um dieses Meerwasser herzustellen, ist es zunächst wichtig, wo man das Wasser hernimmt. Die perfekte Lage wäre dort, wo man auch das Plankton hergenommen hat. Da die Wasserwerte dem Plankton vertraut sind und somit eine höhere Lebenschance besteht.
 

Der nächste Schritt wäre, das noch unberührte Meerwasser durch eine 20 µm Membran zu filtern. In dieser Membran bleibt z.B. Zooplankton hängen, spricht Lebewesen, die das Phytoplankton als Nahrung aufnehmen und somit das Gleichgewicht der Kultur durcheinander bringen.

 

 

 

 

 

Trotz dieser sehr dichtmaschigen Membran wird nicht alles filtriert und somit eine zweite und präzisere Filterung benötigt. Diese folgt durch eine 0,2 µm Filtermembran. Da diese Membran so dichtmaschig ist, dass es zu lange dauern würde, ein Liter Wasser vollkommen durchlaufen zu lassen, erzeugt man mit einer Vakuumpumpe Unterdruck, damit das Wasser letztlich schneller durch die Membran fließt.

 

 

 

Nach diesem Schritt ist es wichtig, alles sehr steril zu bearbeiten. Als Nächstes füllt man das Wasser in eine abgekochte Glasflasche, die keine Bakterien o.ä. enthält. Wenn der Deckel der Flasche wieder geschlossen ist, muss man bedenken, dass jetzt nicht genug Nährstoffe für das Phytoplankton enthalten sind.

 

 

 

 

 

Somit müssen die Nährstoffe hinzugefügt werden und dies wird alles unter einer Clean Bench getan. Die sogenannte Clean Bench zirkuliert mit einem Abzug die Luft und lässt somit kein Staub hinabfallen und keine Luft hineinkommen. Nach jedem Gebrauch wird die Bench eine halbe Stunde unter UV-Licht gesetzt, damit für den nächsten Gebrauch wieder alles steril ist.

 

 

 

Diese Nährstofftabelle ist ein Beispiel und wurde für eine Kieselalge angelegt

Menge      Komponente                  Enthält die Nährstoffe / Elemente
900 µl       NaNO3                             Nitrat / Stickstoff
225 µl       KH2PO4                           Phosphat / Phosphor
62,5 µl      FeEDTA solution              Eisen
62,5 µl      Trace metal solution      Cu, S, Mo, Zn, Co, Mn, Se, Ni
125 µl       F/2 vitamin solution        Vitamin B 12, Biotin, Thiamine
3600 µl     Na2SiO3 x 9H2O             Kieselsäure / Silizium
 

Mit einer speziellen Eppendorf Pipette können die perfekten Mengen pipettiert werden. Dies geschieht durch eine Feder in der Pipette. An einem Rädchen wird die Menge eingestellt, die dann wie bei einer handelsüblichen Pipette eingesogen wird. Wenn die erforderlichen Nährstoffe in das sterile Wasser pipettiert wurden, ist das Wasser für eine Plankton-Kultur bereit und kann verwendet werden.

 

Versuch Herstellen eines Nährmediums beim GEOMAR am 27.Februar 2015                                                                          Eppendorf Pipette: Eppendorf Pipette: http://www.eppendorf.com/script/binres.php?RID=101327